【48812】AIculture慧养® 蜡样芽孢杆菌MPN法共享

　　冷冻样品应在45℃以下不超越15min或在2℃～5℃不超越18h冻结，若不能及时查验，应放于-10℃~-20℃保存；非冷冻而易腐的样品应尽或许及时查验，若不能及时查验，应置于2℃～5℃冰箱保存，24h内查验。

　　称取样品25g，放入盛有225mL的PBS或生理盐水的无菌均质杯内，用旋转刀片式均质器以8000r/min～10000r/min均1min～2min，或放入盛有225mL的PBS或生理盐水的无菌均质袋中，用拍击式均质器敲打1min～2min。若样品为液态，汲取25mL 样品至盛有225mL PBS或生理盐水的无菌锥形瓶（瓶内可预置恰当数量的无菌玻璃珠）中，振动混匀，作为1:10的样品匀液。

　　汲取3.2.2中1:10的样品匀液1mL加到装有9mL PBS或生理盐水的稀释管中，充沛混匀制成1:100的样品匀液。跟据对样品污染情况的估量，按上述操作，顺次制成十倍递加系列稀释样品匀液。每递加稀释1次，换用1支1mL无菌吸管或吸头。

　　取3个适合接连稀释度的样品匀液（液体样品可包含原液），接种于10mL胰酪胨大豆多黏菌素肉汤中，每一稀释度接种3管，每管接种1mL（假如接种量需求超越1mL，则用双料胰酪胨大豆多黏菌素肉汤）。于30°C±1℃培育48h±2h。培育成果如图14所示。

　　用接种环从各管中别离移取1环，划线接种到MYP琼脂平板上，30°C±1°C培育24h±2h。假如菌落不典型，可持续培育24h±2h再调查。

　　从每个平板选取5个典型菌落（小于5个全选），划线接种于养分琼脂平板做纯培育，30°C±1°C培育24h±2h，进行确证试验，同平板计数法。

　　依据证实为蜡样芽孢杆菌阳性的试管管数，查MPN检索表（见附录B），陈述每g（mL）样品中蜡样芽孢杆菌的最或许数，以MPN/g（mL）表明。